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                                    PCR實驗室傳遞窗設計要求【規范】

                                    PCR實驗室傳遞窗設計要求【規范】

                                    時間:2021-1-28 編輯:傳遞窗工程師

                                    注:由于2020年突發新冠,傳遞窗就出現了供不應求的局面,目前傳遞窗應用于各大醫院、PCR實驗室、病房等小物品的傳遞,目的是為了防止空氣對流、避免交叉感染,同時傳遞窗內安裝有紫外線殺菌燈,起到很好的滅菌作用。

                                    PCR實驗室傳遞窗設計要求【規范】

                                    內嵌式傳遞窗

                                    1 、PCR實驗室平面布局

                                    PCR擴增檢驗實驗室原則上分為四個單獨的工作區域:試劑貯存和準備區、標本制備區、擴增反應混合物配制和擴增區、擴增產物分析區。為避免交叉污染,進入各個工作區域必須嚴格遵循單一方向進行,即只能從試劑貯存和準備區→標本制備區→擴增反應混合物配制和擴增區→擴增產物分析區。 各實驗區之間的試劑及樣品傳遞應通過傳遞窗進行。

                                    PCR實驗室傳遞窗設計要求【規范】

                                    PCR實驗室平面布局 

                                    2、實驗室空調通風系統設計及壓力控制

                                    PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,但是為避免各個實驗區域間交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式。同時,要嚴格控制送、排風的比例以保證各實驗區的壓力要求。

                                    2.1、試劑貯存和準備區

                                    該實驗區主要進行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應混合液的制備。試劑和用于樣品制作的材料應直接運送至該區,不得經過其他區域。試劑原材料必須貯存在本區內,并在本區內制備成所需的貯存試劑。 對與氣流壓力的控制,本區并沒有嚴格的要求。

                                    PCR實驗室傳遞窗設計要求【規范】

                                    2.2、標本制備區

                                    該區域主要進行的操作為樣本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定DNA的合成。 本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為正壓,以避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染。另外,由于在加樣操作中可能會發生氣溶膠所致的污染,所以應避免在本區內不必要的走動。

                                    2.3、擴增反應混合物配制和擴增區

                                    該區域主要進行的操作為DNA擴增。此外,已制備的DNA模板 (來自樣本制備區)的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和制備區)制備成反應混合液等也可在本區內進行。 本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免氣溶膠從本區漏出。為避免氣溶膠所致的污染,應盡量減少在本區內的不必要的走動。個別操作如加樣等應在超凈臺內進行。

                                    2.4、擴增產物分析區

                                    該區域主要進行的操作為擴增片段的測定。 本區是最主要的擴增產物污染來源,因此對本區的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免擴增產物從本區擴散至其它區域。

                                    3、污染的預防與控制

                                    PCR實驗室設計的核心問題是如何避免污染。在實際工作中,常見的有以下幾種污染類型:擴增產物的污染;天然基因組DNA的污染;試劑的污染以及標本間的污染。由于一旦發生污染,實驗就必須停止,直到找到污染源為止,而且實驗結果必須作廢,需重新進行實驗。所以發生污染后再圍繞實驗室來尋找污染源不但耗時而且繁瑣,浪費人力物力。因此要避免污染,首先應是預防,而不是排除。

                                    3.1、工作區域的嚴格劃分

                                    (1)各個實驗區域設置合理;

                                    (2)各個實驗區域要有明顯的標記(如醒目的門牌或不同的地面顏色等),以避免各個不同實驗區域設備物品、試劑等發生混淆。

                                    3.2、合理的系統設置

                                    (1)合理的空調通風系統設置,盡量采用全送全排的空調系統;

                                    (2)嚴格的氣流壓力控制,保證不同的實驗區內不同的壓力要求。

                                    3.3、 規范的操作

                                    (1)擴增檢驗實驗室的技術人員必須進行上崗培訓,經培訓合格后才能從事臨床基因擴增檢驗的工作;

                                    (2)在實驗操作過程中,操作者必須戴手套,并經常更換。此外,操作中使用一次性帽子也是一個有效地防止污染的措施;

                                    (3)清潔工作及時、正確。實驗工作結束后,必須立即對本區進行清潔。除常規的消毒液體對表面進行擦拭消毒或紫外線燈的照射消毒外,對一些實驗設備還應進行高壓消毒處理。

                                    3.4、嚴格的管理

                                    (1)嚴格控制進出實驗室的人員。與實驗無關的人員不得隨意進出實驗室,有條件的情況下要設置獨立的通道和進出整個實驗區的門;

                                    (2)盡量減少在實驗區內不必要的走動以減少交叉污染的可能性。

                                    (3)擴增產物分析區是最主要的擴增產物污染來源,廢液不能在實驗室中傾倒,必須經消毒液浸泡消毒后在遠離實驗室的地方棄掉,用過的吸頭等一次性材料也應經消毒液浸泡消毒后統一處理,如焚燒等;

                                    (4)擴增產物分析區可能會用到某些可致基因突變和有毒物質,應特別注意實驗人員的安全防護。

                                    3.5、完備的實驗室配套設施

                                    完備的實驗室配套設施是保證實驗工作的必要條件,應根據各個實驗室實驗內容的不同配備相應的設備和儀器,如超凈工作臺、離心機、互鎖傳遞窗、加樣器等。

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